植物組織培養苗的管理
光照對離體培養物的生長(cháng)發(fā)育具有重要的作用。通常對愈傷組織的誘導來(lái)說(shuō),暗培養比光培養更加合適。但器官分化需要光照,并隨著(zhù)試管苗的生長(cháng),光照強度需要不斷地加強,才能使小苗生長(cháng)健壯,并促進(jìn)它從“異養”向“自養”轉化,以提高移植后的成活率。普通培養室要求每日光照12~16h,光照強度為1000~50001x。如果培養材料要求在黑暗條件中生長(cháng),可用鋁箔或者適合的黑色材料包裹在容器的周?chē)蛑糜诎凳抑信囵B。植物組織培養苗對溫度的調控要求要比光照顯得更為突出。不同的植物有不同的最適生長(cháng)溫度,大多數植物最適溫度在23~32C。培養室一般所用的溫度是(25±2)C,低于15C或高于35C,對生長(cháng)都是不利的。而這些條件又不是固定不變的,它是因不同植物、不同外植體或外植體分化的不同階段而不同的。山葵組織培養,其植物組織培養苗的培養溫度總保持在18~20C,小苗才分化迅速生長(cháng)良好,超過(guò)20C,小苗就顯得無(wú)精打采,到23C小苗葉就開(kāi)始發(fā)黃。而卡特蘭組織培養苗要在23C以上時(shí)才能很好生長(cháng)。
一般菊科組織培養苗的培養溫度不宜超過(guò)25 C,仙客來(lái)組織培養苗培養溫度在20C為合適,溫度再高就不利于生長(cháng),蝴蝶蘭則要在25C才能很好生長(cháng),溫度高到30C也能生長(cháng)。所以在植物組織培養苗的培養管理中一定要注意結合植物的實(shí)際要求控制培養溫度。由于植物組織培養苗是在空間很小的植物組織培養瓶?jì)壬L(cháng)的,其瓶?jì)葴囟仁芡饨缬绊懞艽?尤其是光照的影響,實(shí)踐證明植物組織培養瓶在光照的條件下內部溫度要比外界溫度高1~3C,如果是太陽(yáng)光的自然光照,相差就更遠了,一般要相差3~5C。也就是說(shuō)如果采用太陽(yáng)光光照進(jìn)行培養,如培養架所處的環(huán)境溫度是25C,則植物組織培養瓶?jì)鹊臏囟纫堰_到30C,要是在這樣的條件下培養仙客來(lái)或非洲菊那就很難得到成功。況且自然界太陽(yáng)光強弱變化無(wú)窮,多云時(shí)的光照強度與云層散去太陽(yáng)光直接照射時(shí)的光照強度要相差3~5倍。清晨、正午、傍晚太陽(yáng)光的光照強度相差也在3~6倍,甚至更多。
陽(yáng)光照,哪怕是一個(gè)小時(shí),都有可能的溫度對指片的格物組織培養苗來(lái)說(shuō)是致命的,很可能在一個(gè)中午就造就保證做到在自然環(huán)境發(fā)生變化時(shí)有相50C,這樣范在先,十瓶植物組織培養苗的死亡。所以必須防應的措施跟上,如遮光等。另外植物組織培養瓶往往是一個(gè)個(gè)排列整齊擺放在培養架上,如果培養架四面不能通風(fēng)則在光照的條件下熱能很難散去,瓶?jì)葴囟纫矔?huì )居高不下,對植物組織培養苗生長(cháng)不利。
濕度對植物組織培養苗的影響與控制一是培養室的濕度,它的濕度變化隨季植物組織培養中的濕度影響主要有兩個(gè)方面。節和天氣而有很大變動(dòng),濕度過(guò)高或過(guò)低都是不利的,過(guò)低造成培養基失水而干枯,或滲透壓升高,影響培養物的生長(cháng)和分化,濕度過(guò)高會(huì )造成雜菌滋長(cháng),導致大量污染。因此,要求室80%的相對濕度。濕度過(guò)高時(shí)可用除濕機來(lái)降濕,過(guò)低時(shí)可通過(guò)噴水來(lái)增內保持70%~80%的相對濕度。二是培養器內的濕度,一般來(lái)說(shuō)植物組織培養瓶?jì)鹊臐穸仁呛芨叩?它的濕度條件?杀WC100%隨時(shí)間的延長(cháng)植物組織培養瓶?jì)鹊臐穸纫苍谧兓?但植物組織培養苗在瓶里如濕度不合適也同樣無(wú)法正常生長(cháng)。而瓶?jì)葷穸鹊目刂浦饕膳囵B基和封口膜來(lái)決定的。瓶?jì)扰囵B基的多少和配制培養基時(shí)每升培養基內瓊脂的多少都與瓶?jì)葷穸扔嘘P(guān)。一般瓶?jì)扰囵B基很少,其瓶?jì)认鄬穸纫矔?huì )較低,反之其瓶?jì)葷穸认鄬σ簿洼^高。在配制培養基時(shí)瓊脂用量較大,如每升用瓊脂粉7~8g配成的培養基發(fā)硬,則瓶?jì)葷穸炔粫?huì )很高。而每升用京脂粉6g左右配成的培養基則發(fā)軟,瓶?jì)葷穸认鄬^高。根據不同植物對濕度的不同要求,有時(shí)在配培養基時(shí)調整瓊脂的用量來(lái)滿(mǎn)足所要培養的植物對濕度的要求。
植物組織培養中,植物組織培養苗的呼吸需要氧氣。在液體培養中,振蕩培養可解決通氣問(wèn)題。在固體培養中,最好采用通氣性好的瓶蓋或瓶塞。
植物組織培養苗的培養條件的調控
1.光照的調控
一是合適的培養室位置,一般選擇在陽(yáng)面,2~3層樓。光照條件會(huì )好些,可以節約電源。二是使用電子石英控時(shí)器來(lái)自動(dòng)控制人工照明時(shí)間。三是培養架排列要與窗玻璃垂直,便于陽(yáng)光分布均勻。
2.濕度的調控
一是培養室天棚、地面、墻壁要有保溫處理。溫度的調控四是中午陽(yáng)光比較充足時(shí),靠近窗附近處日照太強,要用窗簾遮陽(yáng)。
三是每個(gè)培養室內盡量培養一種或一類(lèi)植物,便于調節到植物生長(cháng)的最適溫度。二是用空調或控溫儀來(lái)調控室內溫度
3.濕度的調控
一是調節室內濕度,通過(guò)加濕器來(lái)增加濕度,通過(guò)除濕機來(lái)降低濕度。二是調節培養器內濕度,通過(guò)增加培養基量,適當減少瓊脂用量,使用不透氣的封口膜增加濕度,相反彈 降低濕度。
4.氧氣的調控
固體培養基主要是通過(guò)通氣性好的瓶蓋或瓶塞來(lái)增加氧氣,液體培養基是通過(guò)振需培養來(lái)增加氧氣。