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高等植物組培中單倍性的意義

  由于多數突變是性,當同源染色體上有顯性等位基因存在時(shí),它們不能表現,因此在高等植物中突變常常不易發(fā)現·為了使隱性性狀表現出來(lái),需要對攜有突變的植株反復自交.然而,某些物種,如茶和黑麥等,是自交不親合的,不可能自交.此外,即使在有可能自交的情況下,4個(gè)個(gè)體中也只能有1個(gè)表現這個(gè)隱性性狀·如果發(fā)生了不止一個(gè)愉性突變,要想得到一個(gè)能表現所有突變性狀的個(gè)體,機會(huì )還要少得多。與此相反,在單倍體中誘發(fā)突變很容易表現出來(lái),這是因為單倍體只有一套基因,性突變的作用不會(huì )受到顯性等位基因的干擾。攜有有利突變的單倍體一經(jīng)發(fā)現,就可以在一個(gè)世代之內,通過(guò)染色體加倍,而成為表現所有有利突變的可育二倍體。
  
  當對多細胞生物體進(jìn)行誘變處理之后,突變常常呈嵌合體狀態(tài)存在。為了避免這種現象,理想的辦法是處理單個(gè)細胞,然后再由這些細胞產(chǎn)生完整植株。為了達到這個(gè)目的,可以在離體誘導雄核發(fā)育之前用誘變劑處理花藥;蛘呤,由花櫥單倍體植株制備葉肉原生質(zhì)體或建立細胞懸浮培養,用誘變劑處理這些單細胞系統,然后對細胞系進(jìn)行選擇,并由人選的細胞系獲得完整的植株。取決于所用選擇劑的不同,這些植株可能具有耐熱、抗植物病原菌毒素、耐鹽或抗除草劑等特性·Devreux和Saccardo(1971)以大約1000R的X一射線(xiàn)在小孢子正進(jìn)行有絲分裂時(shí)照射煙草花蕾,然后山這些花蕾中取出花藥進(jìn)行培養。在所得到的單倍體植株中,有50%在株高、葉形和顏色上出現了表現型變異。矮牽牛的單倍體。
  
  細胞培養物還被用于獲得抗鏈霉素細胞系,在煙草中被用于獲得抗5一溴脫氧尿苷細胞系。
  
  除了便于發(fā)現隱性突變以外,利用單倍性還可以既快又容易地建立等基因純系。在具有高度雜合性的異花授粉作物中,用傳統的方法固定特定性狀需要7一8年的時(shí)間,若采用FI代植株花藥培養的辦法,只要一個(gè)世代就可達到這個(gè)目的。
  
  此外,由于是單倍體,花粉胚作為轉基因受體具有特殊的優(yōu)勢。例如,在油菜中,當用基因槍將外源DNA導人單個(gè)的花粉胚之后,再生了轉基因植株,經(jīng)染色體加倍,從中獲得了純合轉化體。離體的大麥小孢子道過(guò)PEG誘導攝人了外源DNA之后,表現了與未經(jīng)處理的對照一樣的雄核發(fā)育潛力。這些研究表明了使用花胚或小孢子作為轉基因受體產(chǎn)生穩定的轉化體的可能性。
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