一、植物組織培養實(shí)驗室的設置

　　

　　植物組織培養實(shí)驗室與其他實(shí)驗室的主要區別是要求無(wú)菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。植物組織培養實(shí)驗室的面積大小和裝備取決于兩個(gè)因素：一是實(shí)驗性質(zhì)和研究?jì)热�，二是能承受的�?jīng)費能力。然而，一個(gè)標準的植物組織培養實(shí)驗室必須具備下列條件：①清洗和儲存玻璃器皿、塑料器皿和其他實(shí)驗器皿；②培養基的配制、滅菌和儲存；③植物材料的無(wú)菌操作；④可控溫度、光照、濕度等條件，以便對材料進(jìn)行體外培養；⑤培養物生長(cháng)發(fā)育過(guò)程的顯微觀(guān)察。因此，植物組織培養實(shí)驗室至少需要有三間相連但相互隔開(kāi)的房間：間用于玻璃器皿的清洗和儲存，以及培養基的制備(稱(chēng)為培養基室)；第二間用于無(wú)菌操作(稱(chēng)為接種室)；第三間用于放置培養物(稱(chēng)為培養室)。此外，如果條件許可，應配備能進(jìn)行組織和細胞生長(cháng)顯微觀(guān)察的細胞學(xué)實(shí)驗室。

　　

　　(一)培養基室

　　

　　培養基室的清洗區應備有各種類(lèi)型的毛刷、大水槽和冷熱水源。此外，還應備有塑料桶，用以浸泡需要清洗的實(shí)驗室器皿；鼓風(fēng)干燥箱，用以干燥清洗后的器皿；防塵廚，用以?xún)Υ娓蓛舻钠髅�。條件允許的話(huà)，清洗區應單獨設一個(gè)房間。如果培養基的制備和器皿的清洗在同一個(gè)房間內進(jìn)行，應特別注意不要使清洗干擾培養基的制備，嚴格防止肥皂水等濺入培養基內�？梢栽谇逑磪^與培養基制備區之間臨時(shí)加一塊擋板，或把清洗時(shí)間和配制培養基時(shí)間錯開(kāi)。

　　

　　配制培養基所需的一般設備包括以下幾種。①工作臺：工作臺的高度應適合于操作人員工作，要求表面平整、耐高溫、放置水平。②低溫冰箱：用以?xún)Υ骈L(cháng)期保存的藥品。③普通冰箱：用以?xún)Υ娓鞣N化學(xué)藥品、植物材料和短期儲存儲備液及母液等。④大塑料瓶：用以?xún)Υ嬲麴s水。⑤天平：用于稱(chēng)量。⑥電熱磁力攪拌器：用以溶解化學(xué)藥品。⑦電爐：用于加熱溶化瓊脂和手提式高壓滅菌鍋的加熱。⑧酸度計或pH試紙。⑨抽氣機或真空泵：用以輔助過(guò)濾滅菌。⑩恒溫水�。河糜谌诨�瓊脂。⑩高壓滅菌鍋：用以進(jìn)行培養基滅菌。⑩其他用具。

　　

　　(二)接種室

　　

　　接種室也稱(chēng)為無(wú)菌操作室，好能與外界隔離，不能穿行或不受其他干擾。接種室分更衣間、緩沖間及操作間三部分。更衣間供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩之用。緩沖間位于更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無(wú)菌環(huán)境，同時(shí)可放置恒溫箱及某些小型儀器。操作間則用于無(wú)菌操作，其大小要適當，且其頂部不宜過(guò)高以保證紫外線(xiàn)的滅菌效果，墻壁光滑無(wú)死角以便清洗和消毒。接種室為密閉式，用紫外線(xiàn)滅菌燈進(jìn)行空氣消毒。有些實(shí)驗室使用電子消毒滅菌器，它在高壓電場(chǎng)作用下，電子管的內外電極發(fā)生強烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑，能與細菌的胞膜及酶蛋白進(jìn)行氧化分解反應，因此靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌的目的，使消毒時(shí)沒(méi)有死角。消毒后空間內的殘留臭氧只需30～40min即能自行還原成氧氣，對空間不留異味、消毒物體表面不留殘毒。

　　

　　接種室的主要儀器設備是超凈工作臺。超凈工作臺可直接購買(mǎi)，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好，為植物組織培養工作提供了良好的無(wú)菌操作環(huán)境。

　　

　　(三)培養室

　　

　　培養室的溫度必須是可控的，一般是用空調或熱風(fēng)機使溫度保持在(25±12)℃。若要求更高或更低的溫度，可使用裝有熒光燈的培養箱。培養箱可安裝在培養室之外任何方便和安全的地方。

　　

　　植物組織培養要求一定的光照，采用日光燈源，一般光照強度為1000～30001x。但有些實(shí)驗需要在散射光下進(jìn)行，有些則要求完全黑暗條件。因此，在設備上對此應有所準備。光源可由自動(dòng)定時(shí)開(kāi)關(guān)控制。暗培養一般是在特制的木櫥內進(jìn)行或加蓋黑布。

　　

　　培養室的濕度應控制在相對濕度80％左右，當培養室的相對濕度降低到50％以下時(shí)，應采取措施增加濕度，以免培養基變干。如果濕度太高則應除濕，以免培養瓶蓋塞發(fā)潮，增加污染的機會(huì )。

　　

　　在培養室內應設有若干培養架以放置培養物。培養架大小一般為1200mm×600mm×400mm，層數根據培養室的空間高度而定，每層培養架裝上玻璃板。但玻璃板下面的日光燈在工作時(shí)易使玻璃發(fā)熱，使放置其上的培養瓶及培養基的溫度增加，影響培養效果。安裝剛硬的鐵絲網(wǎng)或細鋼管，在其上放篩孔塑料盤(pán)，以便空氣流動(dòng)和穩定溫度，同時(shí)也可使頂層的燈光能透射到下層的培養物上。培養架可以木制也可以鋼制，每層分別裝有日光燈管。燈管和上一層架子之間裝有隔熱層，以免上層培養物的底部受熱。

　　

　　三角瓶、玻璃罐或培養皿都可直接置于培養架上，或先置于大小合適的盤(pán)子上。再將盤(pán)子置于培養架上。所用的容器若為試管，就需要有試管架。試管架可用鐵絲制作，每個(gè)試管架能裝25個(gè)或50個(gè)試管。培養容器必須粘上標簽或用記號筆標注，注明詳細的實(shí)驗細節(植物名稱(chēng)、外植體、培養基、培養時(shí)間等)。

　　

　　培養室內應設有搖床，以便進(jìn)行液體懸浮培養。搖床可以是平動(dòng)式的，也可以是旋轉式的。應選購溫光可控式搖床。