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植物組織培養實(shí)驗室構成

  一個(gè)標準的組織培養實(shí)驗室應當包括:洗滌室、準備室、接種室、培養室、觀(guān)察室(或細胞學(xué)實(shí)驗室)、貯存室、溫室等。在實(shí)際中可結合實(shí)驗條件,合并部分實(shí)驗室。
  
  1.洗滌室
  
  洗滌室專(zhuān)門(mén)負責植物材料的初步清洗處理(例如把帶泥土和雜菌多、易污染的部位削掉,以便進(jìn)一步?jīng)_洗消毒)、試管苗出瓶、玻璃器皿等清洗與整理工作,室內應配備1至幾個(gè)水槽或清洗玻璃器皿的機器,1~2個(gè)洗液缸,為防止碰壞玻璃器皿,可鋪墊橡膠,地面要耐濕并能排水,上下水道要暢通,備有塑料筐用于運輸培養器皿,備有干燥架用于放置干燥刷凈的培養器及存放干凈玻璃器皿的柜子等,把滅菌鍋、蒸餾水發(fā)生器放在此室內。
  
  2.準備室
  
  主要用于植物細胞組織培養和試管苗生產(chǎn)所需要的各種器具的干燥和保存,培養基藥品的稱(chēng)量、溶解、配制、分裝和高壓滅菌、化學(xué)試劑的存放及配制,重蒸水的生產(chǎn)、植物材料的預處理及培養物的常規生理生化分析等操作都在準備室中進(jìn)行。為了配制各種培養基,室內必須有一個(gè)較大的平面工作臺及存放各種培養基所需化學(xué)試劑的藥品柜,以及放置常用玻璃器皿、試劑和常用的設備等。準備室要求面積大、明亮、墻上安裝有換氣扇,墻的內壁和工作臺都要采用耐腐蝕的材料。為了避免工作人員進(jìn)出時(shí)將雜菌帶入,準備室中也可安裝紫外燈,隨時(shí)可以滅菌。
  
  3.接種室
  
  接種室是進(jìn)行植物材料的分離接種、培養物的轉移、試管苗的繼代等的一個(gè)重要操作實(shí)驗室,無(wú)菌條件的好壞、持續時(shí)間的長(cháng)短對降低培養物的污染。提高效率關(guān)系很大。接種室除了出入口外,其余應全部密閉,一般不安裝風(fēng)扇,保證沒(méi)有空氣對流,通風(fēng)換氣需借助空氣調節裝置進(jìn)行。接種室的面積要看工作量的大小、接種人員的多少及接種設備的情況而定,在工作方便的前提下,接種室宜小不宜大,一般10~12m2,為便于放置超凈工作臺門(mén)需稍大,應裝成雙扇滑門(mén),以減少開(kāi)關(guān)門(mén)時(shí)的空氣擾動(dòng),要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒。室內干爽安靜,清潔明亮,在適當位置安裝1~2盞紫外線(xiàn)燈,用以照射滅菌消毒,最好安裝一臺小型空調,使室溫可控,這樣可使門(mén)窗緊閉,減少與外界空氣對流。如果有條件可將接種室外再設置一個(gè)緩沖間,面積3m2為宜,進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋帽等,以減少進(jìn)出時(shí)帶入雜菌,緩沖間最好也安裝一個(gè)紫外線(xiàn)滅蔭燈,用以照射滅菌。
  
  4.培養室
  
  為滿(mǎn)足培養材料生長(cháng)、繁殖所需的溫度、光照、濕度和通風(fēng)等條件,一般培養室要求非常衛生、恒溫并有理想的光照控溫系統。培養室的溫度應當是可控的,為使溫度恒定和均勻,應配有帶自動(dòng)控溫的電暖氣或空調等設備,使溫度保持在(25±2)℃,晚上一般不應低于20℃。由于熱帶植物和寒帶植物等物種要求不同溫度,最好不同物種有不同的培養室。若要求更高或更低的溫度,可使用裝有熒光燈的培養箱。
  
  培養室應建在房屋的南面,除南面有大窗戶(hù)外,東邊或兩邊也應有大窗戶(hù),以便盡量利用自然光。培養室的大小,可根據需要培養架的大小、數目以及其他附屬設備而定,其設計以充分利用空間及節省能源為原則,高度比培養架略南為宜,周?chē)鷫Ρ谝笥薪^熱防火的性能,最好裝成滑門(mén),便于保溫,節省能源。
  
  現代組培文驗窒大多設計為采用天然太陽(yáng)散射光作為主要能源。這樣可以節約能源,而且組培苗接受太陽(yáng)光生長(cháng)良好,馴化易成活。培養室的光源通常采用普通的白色日光燈,可在陰天用于補光,但有些情況下也需要較強的光照或完全黑暗。光源設備上可安裝定時(shí)開(kāi)關(guān)鐘,無(wú)須每天要人工開(kāi)關(guān)燈,一般需要每天光照10~16h。暗培養一般是在生化培養箱里進(jìn)行的。在培養室內應設有若干培養架以放置培養物,培養材料放在培養架上培養。培養架大多金屬制成,一般設5層,最低一層離地高約20cm,其他每層間隔30cm左右,培養架高1.7m左右。培養架長(cháng)度都需依日光燈的長(cháng)度而設定。
  
  培養室的濕度也是一個(gè)值得考慮的問(wèn)題,相對濕度以保持在70%~80%為好?砂惭b自動(dòng)加濕器或恒溫恒濕機,當培養室的相對濕度降到50%以下時(shí),應采取措施增加濕度,以免造成試管或培養容器內培養基干涸。如果濕度太高,棉塞發(fā)潮,培養物污染的機會(huì )就會(huì )增加。
  
  如果要進(jìn)行懸浮培養,培養室內還應設有搖床,可以是平動(dòng)式的也可以是旋轉式的。必要時(shí)也可購置溫光可控式搖床。若有條件,最好設置一臺備用發(fā)電機,以便在停電時(shí)使用。
  
  5.觀(guān)察宣或細胞學(xué)實(shí)驗室
  
  如果條件允許,可設置一間觀(guān)察室,放置顯微鏡、解剖鏡或照相設備,便于對實(shí)驗材料進(jìn)行認真觀(guān)察、分析和照相。
  
  6.貯存室
  
  如果條件允許,最好設置一間貯存室,把暫時(shí)不用的器皿、用具等存放在貯存室內,也可以用作種質(zhì)保存。這種房間應當陰涼,室溫較低,能見(jiàn)一點(diǎn)散射光更好。
  
  7.溫室
  
  若條件許可,可建立人工氣候室及試管苗煉苗用的溫室。試管苗移栽必須要有溫室,建造溫室如用鋼架、玻璃成本太高,可用單坡塑料大棚代替,這種大棚在向陽(yáng)面搭棚,其余三面打墻,以防風(fēng)保溫,成本低廉。溫室的面積依據科研和生產(chǎn)實(shí)際情況而定。為了節省投資,降低成本,組織培養實(shí)驗室建得不要太大。據報道,國外建立私人或家庭組織培養實(shí)驗室,面積36~40m2,每年生產(chǎn)組織培養苗數10萬(wàn)株,可供數個(gè)苗圃地育苗需要。
組培室設備
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