花藥的培養主要有三種：一是在瓊脂固化培養基表面培養，二是在加入30%Ficoll的液體培養基表面漂浮培養，三是利用固態(tài)液體雙層培養基培養，以便既能保持較高的接種密度，培養基又不易失水干涸。

　　花藥對培養溫度的要求因物種而不同，對于大多數小麥品種來(lái)說(shuō)，在培養的最初6d給以30、32℃的較高溫度，然后再轉人28、30·c下培養，花藥出愈率會(huì )有明顯提高。水稻花藥培養的適宜溫度從一開(kāi)始就是27·C。愈傷組織分化階段對溫度的要求不像誘導階段那樣嚴格，例如小麥在17℃和30℃下花粉愈傷組織分化頻率沒(méi)有顯著(zhù)差異，水稻花粉植株的分化也多在和誘導期間相同的溫度下進(jìn)行。

　　對光照的要求在物種間差異更為明顯，例如連續光照可顯著(zhù)增加煙草花粉胚的產(chǎn)量，卻強烈抑制曼陀羅的花粉胚胎發(fā)生。禾谷類(lèi)植物在花粉愈傷組織誘導期間則以暗培養或散射光培養效果較好，強光會(huì )抑制小麥花粉愈傷組織的形成。愈傷組織的分化原則上都應在光照下進(jìn)行，但對光照強度和照光時(shí)間的要求則因物種而異。例如水稻花粉愈傷組織在轉人分化培養基之初仍不宜照光培養，須待3～5d后再給以每天14h1000～2000lx的光照，以免引起愈傷組織的老化壞死。對小麥花粉植株則不宜給以長(cháng)日照。