1.無(wú)菌體系的建立

　　

　　1）外植物的選取、滅菌和接種

　　

　　選擇適宜當地栽培的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)或用途特殊的甘薯品種植物作為母株，取枝條，剪去葉片后切成數段。每段帶一個(gè)腋芽，含頂芽的2-3節。

　　

　　剪好的莖段流水數分鐘后。用濾紙吸干表面水分后70%酒精中浸泡10s，在用0.1%升汞溶液消毒10min，用無(wú)菌水沖洗5次；或用10%次氯酸鈉溶液消毒15min，用無(wú)菌水沖洗3次。

　　

　　把消毒好的芽放在立體顯微鏡下，無(wú)菌削去丁芽和腋芽上較大的幼葉，切去0.3-0．5mm含1～2個(gè)葉原基的莖尖組織，接種在培養基上。

　　

　　2）培養基及培養條件

　　

　　甘薯莖尖培養較理想的培養基為MS+IAA0，1一0，2mg/L+6-BA0．1一0．2mg/L+3％蔗糖，pH值為5．8～6，0。若添加GA3().05mg/L，對莖尖的生長(cháng)和成苗會(huì )有更好的促進(jìn)作用。培養條件以溫度25～28℃，光照強度巧00、2000lx，光照14h/d為宜。

　　

　　2，初代培養

　　

　　不同品種的莖尖生長(cháng)情況有差異。一般培養10d莖尖膨大并轉綠，培養20d左右莖尖形成2～3mm的小芽點(diǎn)，且在基部逐漸形成綠色愈傷組織。此時(shí)應將培養物轉人無(wú)激素的MS培養基上，以阻止愈傷組織的繼續生長(cháng)，使小芽生長(cháng)和生根。芽點(diǎn)基部少量的愈傷組織對莖尖生長(cháng)成苗有促進(jìn)作用，但愈傷組織的過(guò)度生長(cháng)對成苗則非常不利，且有明顯的抑制作用。

　　

　　3．初級快速繁殖

　　

　　當薯苗長(cháng)至3～6cm高時(shí)，將小植株切段進(jìn)行短枝扦插，除頂芽一般帶有]、2片展開(kāi)葉片外，其余的切段都是具一節一葉的短枝·切段直插于三角瓶?jì)葻o(wú)植物生長(cháng)物質(zhì)的MS培養基中，培養條件同莖尖培養。2～3d內，切段基部即產(chǎn)生不定根，30d后長(cháng)成具有6、8片展開(kāi)葉的試管。

　　

　　4．脫毒苗快速繁殖

　　

　　試管苗經(jīng)嚴格檢測確認為脫毒苗后，可進(jìn)行試管切段快速繁殖。試管繁殖脫毒苗一般30、40d為一個(gè)繁殖周期，一個(gè)腋芽可長(cháng)出5片以上的葉，繁殖系數約為5。為降低人工培養的成本，可用食用白糖代替蔗糖；將培養基中的大量元素減半，甚至用I/4MS（大量元素）培養基；盡可能利用自然光照培養；也可用經(jīng)檢驗合格的自來(lái)水代替蒸餾水或無(wú)離子水。

　　

　　5@試管苗馴化栽

　　

　　l)試管苗馴化移栽

　　

　　取株高達到3～5cm的健壯苗，將瓶塞打開(kāi)，置室溫和自然光照下鍛煉2～3d，使幼苗逐漸適應外界環(huán)境條件。移栽時(shí)倒人一定量的清水，振搖后松動(dòng)培養基，小心取出幼苗，洗去根部的培養基以防雜菌滋生，再移至滅菌的蛭石或沙性土壤中。待苗生根、長(cháng)出新葉后再移植于土壤中，有利于苗的快速生長(cháng)·

　　

　　2）試管苗馴化移栽管理

　　

　　基質(zhì)溫度是根系成活的關(guān)鍵，但不宜過(guò)濕·應維持良好的通氣條件，促使根生長(cháng)�？諝庖矐�保持濕潤，以防試管苗失水枯死·移栽初期，可用塑料薄膜覆蓋·溫度以25～30℃為宜，并注意遮陽(yáng)，避免日曬·脫毒苗繁育雖在防蟲(chóng)網(wǎng)內進(jìn)行，但有時(shí)會(huì )因封閉不嚴或土內自生性出蚜，而導致網(wǎng)內有蚜蟲(chóng)等現象發(fā)生，或者出現地下害蟲(chóng)危害。為此，應定期噴灑農藥，防治病蟲(chóng)害。

　　

　　6．適時(shí)定植

　　

　　蛭石缺乏植物生長(cháng)必需的營(yíng)養，故當薯苗成活后，應及時(shí)植于防蟲(chóng)網(wǎng)內已消毒的土壤中，促使其生長(cháng)·為提高網(wǎng)室利用率，定植的薯苗應適當密植·采取剪秧打插、以苗繁苗的方式，可在短期內得到數量巨大的脫毒苗。在北方，為克服冬、春溫度過(guò)低的影響，可建立防蟲(chóng)溫室，并輔以取暖升溫措施，保證脫毒全年進(jìn)行繁育。以此法繁育的薯苗在防蟲(chóng)網(wǎng)內所結薯塊即為原原種薯。