學(xué)習目標
。1)了解培養基中各成分的作用。
。2)了解培養基母液的作用,明確母液配制的目的和意義
。3)能按照配方獨立進(jìn)行各類(lèi)培養基母液的配制與保存。
任務(wù)要求
由教師提出任務(wù),師生共同探究培養基配方各類(lèi)成分的特點(diǎn)以及作用,然后根據生產(chǎn)實(shí)際制訂培養基母液配制計劃,并在教師指導下各小組分工來(lái)完成各種母液的配制任務(wù)。
一、任務(wù)提出
。ǔS玫呐囵B基有哪些?
。2)一個(gè)完善的培養基配方的成分有哪些?各有何作用?
。3)各種成分如何添加到培養基中?
。4)為什么要配制母液?
。5)各種母液是如何配制的?
二 、任務(wù)分析
植物組織培養所選用的培養基有幾十種,而每種又包括多種成分,可以根據不同的需要來(lái)選擇不同的培養基。在這些培養基中有些成分的用量非常微小,如果每次配制培養基時(shí)都即時(shí)稱(chēng)量,不僅費時(shí)費工,也不夠準確,因此可以根據配方特點(diǎn)預先配制成母液.每液在配制的過(guò)程中,可以根據每種元素的化學(xué)性質(zhì)、用量等來(lái)進(jìn)行區分,配制成不同的母液:
三、相關(guān)知識
在植物組織培養過(guò)程中,培養基的配制是一項最基本的工作。配制每種培養基需要十丿L種化合物,配制起來(lái)十分不方便,特別是微量元素和梢物生長(cháng)激素的用量極少,很難達到精確稱(chēng)量·因此,可將配方中的各種元素按照一定的方式,配成一些濃縮液,用時(shí)稀釋?zhuān)@種濃縮液就是濃縮儲備液(簡(jiǎn)稱(chēng)母液母液不僅可以解決上述問(wèn)題,而且還可以減少工作量,使用起來(lái)非常方便,提高了工作效率,同時(shí)也提高了實(shí)驗的精度·
。ㄒ唬└鞣N母液的配制
1,MS培養基母液的配制
在配置母液過(guò)程中,應先用量量取700~800mL的蒸慵水,放人1000mL的容量瓶中,然后分別稱(chēng)取每種藥品,分別溶解。大量元素在配制的過(guò)程,要注意一定要按照表3.·1給定的排列順序依次混合定容,以免發(fā)生沉淀·鐵鹽母液在配制過(guò)程中,要把硫酸&h(FeSO.·7H區))和乙二胺四乙酸二鈉(Na疒EDTA)分別溶解·然后將乙二胺四乙酸、鈉溶液緩慢倒人硫酸亞鐵(FeS()4·7H》0)溶液中,加熱溶解10min左右,通過(guò)加熱形成穩定的螯合鐵,性質(zhì)比較0定,不易產(chǎn)生沉淀.在配制微量元素母液和有機物母液時(shí)也應分別稱(chēng)重和溶解,對順序要求不是很?chē)栏,一般不?huì )出現沉淀現象·